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　　7-AAD和碘化丙啶(PI)类似，是一种非细胞膜渗透性的荧光染料，不能穿过具有生物活性的细胞质膜，因此被用来区分正常细胞与坏死细胞，也可以被用于细胞固定或通透后的核酸染色。与碘化丙啶(PI)不同的是，被546nm的氩离子激光激发后，7-AAD的发射光谱较PI窄，且发射波长更长，对其它检测通道的干扰更小，在多色荧光分析中是PI的最佳替代品，可与多种488激发光激发的荧光染料联合使用，如FITC (异硫氰酸荧光素)、PE (藻红蛋白)、APC (别藻蓝蛋白)、Calcein AM等，在光谱的600nm左右有较弱的荧光，可用一般的荧光显微镜检测红色荧光，而在远红光650nm左右有较强的荧光，可用流式细胞仪FL3通道或配备650nm长通滤光片的荧光显微镜检测远红荧光。

　　个细胞的沉淀，加入1ml 7-AAD染色工作液，重悬为单细胞悬液。37℃孵育细胞5-15min，不同的细胞最佳孵育时间不同。以5min作为初始孵育时间，根据自己实验的细胞进行优化得到最佳的效果。注：需要准备好仅含缓冲液的细胞样品用作流式细胞仪检测时的阴性对照，该缓冲液与配制7-AAD染色工作液的缓冲液宜保持一致。c.检测。孵育结束后可直接使用流式细胞仪检测，或将细胞铺开于孔板、细胞培养皿或者细胞爬片上，在荧光显微镜下观察。7-AAD插入DNA后的最大激发光波长为546nm，最大发射光波长为647nm。注：在检测前，也可将细胞用PBS洗涤2-3次，最后用每个样品加入0.5-1ml检测缓冲液重悬细胞后用于检测，这样效果更好。